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ELISA试剂盒有六大使用技巧讲解

点击次数:15 发布时间:2019/4/12
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                          ELISA试剂盒有六大使用技巧讲解

ELISA试剂盒有六大使用技巧讲解:
1.查找待测样本的蛋白浓度:可以通过NCBI的文献,uniprot,pax-dab上给出的蛋白表达量参考值来比较ELISA试剂盒中给出的样本值与报道值是否一致;

2。试剂盒的应用种属、检测样本的种类:除试剂盒特别说明外,一般不同种属不能通用。常见待测样本种类有:血清和血浆(不同抗凝剂),细胞上清,和细胞裂解液,试剂盒中不同样本的稀释液不混用;

3.试剂盒的检测范围:也就是标曲范围,特别要注意待测样本浓度是否落在标曲范围内,对于浓度很高的样本,可以先进行预实验摸索到比较好的稀释倍数后再大量测定样本。
 
4.试剂盒中的稀释线性及回收率:
a.稀释线性一般指样本稀释线性,是将样本梯度稀释下来,看各稀释梯度浓度是否成线性;参考样本稀释线性可以选择样本的zui好稀释倍数;
b.稀释线性也有做加标稀释线性的情况,加标稀释线性是将标准品加入样本中测定加入的标准品浓度测定是否准确;同样也是确定待测样本稀释倍数的参考指标。一般线性和回收率的范围在80%-120%比较合适; 

5.试剂盒的其它指标:
a.灵敏度:试剂盒能够检测到的样本zui低浓度的能力,如果待检指标含量很低,需要选择高灵敏度的ELISA试剂盒;
b.板间和板内的变异系数(CV%):反映板内和不同板之间是否均匀,CV%一般小于10% 比较好。

6.试剂盒的有效期:试剂盒的有效期一般是半年至一年,样本准备时间需要考虑到试剂盒的有效期。

 
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