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猪多肽YYelisa检测试剂盒操作步骤

点击次数:59 发布时间:2018/12/11
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猪多肽YYelisa检测试剂盒   操作步骤

1.加样:分别设标准孔、待测样品孔、空白孔。设标准孔 7 孔,依次加入 100μL 不同浓度的标准品 (见试剂准备 2)。空白孔加 100μL(见试剂准备第二步*后一管),余孔加待测样品 100μL,酶标板加上覆膜,37℃ 温育 2 小时。

2.弃去液体,甩干,不用洗涤。

3.每孔加检测溶液 A 工作液 100μL(临用前配制),酶标板加上覆膜,37℃ 温育 1 小时。

4.弃去孔内液体,每孔用 300μL 的洗涤液洗涤,浸泡 1-2 分钟,吸去 (不可触及板壁) 或甩掉酶标板内的液体,在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次 (也可轻拍将孔内液体拍干),重复洗板 3 次。*后一次洗涤后,要把孔内的洗涤液完全甩干。自动洗板机亦可。

5.每孔加检测溶液 B 工作液 (临用前配制)100μL,加上覆膜,37℃ 温育 1 小时。

6.弃去孔内液体,甩干,洗板 5 次,方法同步骤 4。

7.每孔加底物溶液 90μL,酶标板加上覆膜,37℃ 避光显色 (反应时间控制在 15-25 分钟,不要超过 30 分钟。当标准孔的前 3-4 孔有明显的梯度蓝色,后 3-4 孔梯度不明显时,即可终止)。

8.每孔加终止溶液 50μL,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相同。如出现颜色不匀一,请轻轻晃动酶标板以使溶液混合均匀。

9.在确保酶标板底无水滴及孔内无气泡后,立即用酶标仪在 450nm 波长测量各孔的光密度 (O.D. 值)。

 
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