抗染色体抗体试剂盒操作步骤

金秋十月,树上那稀稀拉拉的叶子,干得像旱烟叶一样。大地妈妈敞开宽阔的胸怀像是在迎接、拥抱归来的孩子,落叶回到大地妈妈的怀里,甜蜜地跟泥土睡在一起。接下来介绍   抗染色体抗体试剂盒操作步骤

操作步骤

实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。

抗体的间接法：

用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml,每孔加0。1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。

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加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。（同时做空白、阴性及阳性孔对照）

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于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0。1ml, 37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。

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加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0。1ml,37℃ 10～30分钟。

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终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0。05ml。

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结果判定：可于白色背景上,直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上,于450nm（若以ABTS显色,则410nm）处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2。1倍,即为阳性。