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看过来!这些知识点让你了解儿茶酚胺试剂盒
  • 发布日期:2019-01-17      浏览次数:57
    •   儿茶酚胺试剂盒原理:ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
        儿茶酚胺试剂盒实验操作步骤如下:
        1、标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
        2、加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
        3、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
        4、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
        5、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
        6、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
        7、温育:操作同3。
        8、洗涤:操作同5。
        9、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
        10、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
        11、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值),测定应在加终止液后15分钟以内进行。
        儿茶酚胺试剂盒组成:
        (1)结合物及标本的稀释液;
        (2)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
        (3)酶标记的抗原或抗体(结合物);
        (4)酶的底物;
        (5)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),ELISA试剂盒参考标准品和控制血清(定量测定中);
        (6)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
        儿茶酚胺试剂盒的儿茶酚胺和神经递质在人体和动物中扮演着重要的角色。它们涉及广泛的生理和病理过程。
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